1、將切成塊的土豆放在燒杯中煮30多（duō）分鍾，煮好後過濾溶（róng）液備用。
2、將（jiāng）瓊脂放入溶液中重新燒開，瓊脂完全（quán）溶化後繼（jì）續煮。
3、煮（zhǔ）好後將汁液分放（fàng）至試管內，並（bìng）用高壓鍋（guō）消毒殺菌，斜放試（shì）管，待（dài）凝固後開始接種。
4、用酒精對嫩蘑菇進行殺菌，並在無菌（jun1）箱內切成小塊，切好（hǎo）後再（zài）接種至瓊脂基質上。
5、堵住試管口，將瓊脂基質放入培養箱，待長滿菌絲後即（jí）可獲得一級菌種。
一、怎麽製作菌種
1、一級（jí）菌（jun1）種
（1）將切成塊（kuài）的土豆放入燒杯中，然（rán）後（hòu）煮半個（gè）多小時，煮好後過濾溶液備用。
（2）向溶液內放入瓊脂，再將其燒開，待瓊脂完全溶（róng）化後繼續煮（zhǔ）一段時間。
（3）煮好後，將（jiāng）汁液（yè）分（fèn）放至試管，再用高壓鍋消毒殺菌。消毒後將試管斜放，直到冷涼凝固後即可開始接種。
（4）用酒精對嫩蘑（mó）菇做殺菌處理，然後在無菌箱內切成小塊，接種（zhǒng）至瓊脂基質上麵（miàn）。
（5）用塞子堵上試（shì）管口，再將瓊脂基質放入培養箱中，待長滿菌絲後即可形成（chéng）一級（jí）菌（jun1）種。
2、二級菌種
（1）將煮熟的大豆和穀（gǔ）粒放在無菌環境中晾幹，再用經過高溫殺菌的玻璃瓶（píng）盛裝起來。
（2）將（jiāng）瓶子封口，放入高壓鍋中，經高壓滅菌後放在無菌室冷涼。
（3）將培養瓶放至（zhì）無菌箱內，再放入（rù）一級菌種，用小匙挖出黃豆大小的（de）菌種並接種入玻璃瓶。
（4）接種後要封口，再將玻璃瓶放在培養室中，待長滿菌絲後即可備用。
3、三級菌種
（1）製（zhì）備方法與二級菌種基（jī）本一致，培養基可使用煮熟的麥粒、玉米粒及棉籽。
（2）三級菌（jun1）種的菌絲長滿後即可取（qǔ）出來培育，經曆三級菌種（zhǒng）的培育後可完全製（zhì）成平菇菌。
二、菌種保藏方法
1、斜麵（miàn）低溫保藏法（fǎ）
將菌種接（jiē）種至適宜的固體斜麵（miàn）培養基上，待菌（jun1）種充分生長（zhǎng）後用油紙將棉（mián）塞部分包紮（zhā）好，然後放入冰箱，再將溫度保持在（zài）2-8℃。
2、甘油管保存法（fǎ）
（1）將80%甘油用高（gāo）壓蒸汽做滅菌處（chù）理，再將菌種放（fàng）置在斜麵培養基上培養，用無菌水製成高濃度（dù）的（de）菌懸液。
（2）將1毫升甘油與（yǔ）菌液混勻，使甘油的（de）濃度達（dá）到10-30%，然後放在零下70℃的環境中凍存（cún）。
3、液體石蠟保藏法
（1）將液體石蠟裝入三（sān）角燒瓶內，塞上棉塞，包紮好牛皮紙，然後放在0.1MPa、121.3℃的環境（jìng）中滅菌30分鍾。
（2）滅菌（jun1）後，將燒瓶轉（zhuǎn）移至40℃的（de）溫箱內蒸發水汽。
（3）在斜麵培養基內培養菌種，得到健壯菌體，再用滅菌吸管注入石蠟，注入（rù）量以高出斜麵頂端1厘（lí）米為宜。
（4）將試管（guǎn）直立，最後放置於低溫或室溫環境中保存。
